Триглицериды (в крови)

Триглицериды – одна из основных форм (наряду с холестерином) депонирования жиров в организме, потенциальный источник энергии.

Триглицериды (нейтральные жиры) - это эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот (стеариновой, линолевой, линоленовой, пальмитиновой и др.). Это жиры, присутствующие в жировых тканях и входящие в состав растительных масел. Поступают в организм человека с пищей, перевариваются до жирных кислот и глицерола и всасываются в тонком кишечнике. Ресинтез так называемых «пищевых» триглицеридов происходит в клетках эпителия тонкого кишечника, далее они включаются в состав одного из видов липопротеинов – хиломикронов - и в таком виде транспортируются к тканям. Липопротеины расщепляются липопротеин-липазами, продуцирующимися разными клетками. Освобождающиеся жирные кислоты в жировых клетках ресинтезируются в триглицериды, в мышечных клетках они используются как источник энергии. Жировая ткань депонирует триглицериды (особенно при избыточном поступлении калорий и сниженном расходовании энергии). При необходимости в процессе гидролиза триглицериды расщепляются до глицерина и жирных кислот, давая при утилизации в два раза больше калорий на 1 г массы, чем углеводы и белки. В метаболизм триглицеридов включена печень, где происходит синтез из глицерола и жирных кислот триглицеридов и формирование из холестерина и триглицеридов липопротеинов низкой плотности.

В большинстве случаев повышение уровня трилицеридов («хилез» крови) является следствием особенностей диеты. Вторичная триглицеридемия часто наблюдается при сахарном диабете, злоупотреблении алкоголем, почечной недостаточности. Довольно редко увеличение концентрации триглицеридов может быть следствием наследственных нарушений липидного метаболизма и значения тогда в десятки раз могут превышать верхний предел референсных значений. Уровень триглицеридов крови значительно колеблется в течение дня. После приема пищи через 15-30 мин их содержание в сыворотке крови увеличивается и только через 9-12 ч возвращается к исходному уровню, поэтому определение уровня триглицеридов необходимо проводить натощак, обычно после ночного периода голодания. Содержание триглицеридов также в значительной степени зависит от возраста.

Показания к назначению анализа "Триглицериды"

1. Диагностика первичных и вторичных нарушений метаболизма липидов.
2. В комплексе анализов липидного профиля для оценки риска атеросклероза и его осложнений.

Подготовка к исследованию

Взятие крови утром строго натощак, через 12-14 часов после последнего приема пищи. Накануне принятая пища не должна содержать жиры животного происхождения, а также исключается молочная пища. За три дня до исследования исключить прием алкоголя.

Материал для исследования: сыворотка крови.

Метод определения: ферментативный с липазой и пероксидазой.

Единицы измерения: ммоль/л.

Референтные значения (Триглицериды - норма):

до 10 лет женщины 0,40 – 1,24 ммоль/л;
мужчины 0,34 – 1,13 ммоль/л;
10 – 15 лет женщины 0,42 – 1,48 ммоль/л;
мужчины 0,36 – 1,41 ммоль/л;
15 - 20 лет женщины 0,40 – 1,53 ммоль/л;
мужчины 0,45 – 1,81 ммоль/л;
20 - 25 лет женщины 0,41 – 1,48 ммоль/л;
мужчины 0, 50 – 2,27 ммоль/л;
25 - 30 лет женщины 0,42 – 1,63 ммоль/л;
мужчины 0,52 – 2,81 ммоль/л;
30 - 35 лет женщины 0,44 – 1,70 ммоль/л;
мужчины 0,56 – 3,01ммоль/л;
35 - 40 лет женщины 0,45 – 1,99 ммоль/л;
мужчины 0,61 – 3,62 ммоль/л;
40 - 45 лет женщины 0,51 – 2,16 ммоль/л;
мужчины 0,62 – 3,61 ммоль/л;
45 - 50 лет женщины 0,52 – 2,42 ммоль/л;
мужчины 0,65 – 3,70 ммоль/л;
50 - 55 лет женщины 0,59 – 2,63 ммоль/л;
мужчины 0,65 – 3,61 ммоль/л;
55 - 60 лет женщины 0,62 – 2,96 ммоль/л;
мужчины 0,65 – 3,23 ммоль/л;
60 - 65 лет женщины 0,63 – 2,70 ммоль/л;
мужчины 0,65 – 3,29 ммоль/л;
>65 лет женщины 0,68 – 2,71 ммоль/л;
мужчины 0,62 – 2,94 ммоль/л.

Повышение значений Триглицеридов

Первичные гиперлипидемии: гиперлипопротеинемии I, Ib, III, IV и V типов, вызванные семейной или спорадической эндогенной гипертриглицеридемией, семейная дисбеталипопротеидемия, наследственный дефицит липопротеинлипазы, семейная комбинированная гиперлипидемия, дефицит кофактора липопротеидлипазы, эрозивные или плоские ксантомы.

Вторичные гиперлипидемии:

1. Ожирение.
2. Нарушение толерантности к глюкозе.
3. Поражения печени: цирроз печени, вирусные гепатиты , обтурация желчевыводящих путей.
4. Острый и хронический панкреатит .
5. Нефротический синдром, хроническая почечная недостаточность.
6. Сердечно-сосудистые заболевания: острый инфаркт миокарда, артериальная гипертония, хроническая ишемическая болезнь сердца, тромбоз сосудов головного мозга.
7. Гипотиреоз.
8. Подагра.
9. Беременность.
10. Гликогенозы I, III и IV типов.
11. Большая талассемия.
12. Синдром Дауна.
13. Респираторный дистресс-синдром.
14. Невротическая анорексия.
15. Идиопатическая гиперкальциемия.
16. Острая перемежающаяся порфирия.
17. Стресс.
18. Высококалорийная пища, диета с высоким содержанием углеводов.
19. Прием таких препаратов, как холестирамин, бета-блокаторы, эстрогены, кортикостероиды, диуретики и т.д.
20. Алкоголизм.

Снижение значений Триглицеридов

1. Гиполипопротеинемия.
2. Гипертиреоз.
3. Гиперпаратиреоз.
4. Недостаточность питания.
5. Синдром нарушенного кишечного всасывания (мальабсорбция).
6. Лимфагиэктазия кишечника.
7. Хронические обструктивные заболевания легких.
8. Прием холестирамина, гепарина, витамина С, прогестинов.

Отзывы

В настоящее время я житель Крыма, узнал о уникальных методах лечения в Клинике приехал сюда с проблемными...

В настоящее время я житель Крыма, узнал о уникальных методах лечения в Клинике приехал сюда с проблемными вопросами своего здоровья. Я прошел диагностику, лабораторные исследования и затем курс лечения. Самочувствие заметно улучшилось, уезжаю с хорошим потенциалом здоровья. Спасибо Валентине Дмитриевне, Валерию Ивановичу, медсестре Натальи Лавриненко за чуткое отношение ко мне

окулисту Ольге Валентиновне оргромадное спасибо за консультацию - очень хороший врач - посоветую всем!

Я пришла в КДК с болью в суставах, выраженным варикозом, жалобами на работу желудка.
После проведения...

Я пришла в КДК с болью в суставах, выраженным варикозом, жалобами на работу желудка. После проведения сеансов ушла острая боль в коленном суставе. Прошла отечность нижних конечностей, вены уменьшились вразмерах, стабилизировалась работа желудка, нормализовалось давление. Никогда в жизни за все время хождения по больницам за столь короткий период мне не делали диагностику, кроме того все исследования безболезнены и необременительны для организма. Сотрудники доброжилательны, видно, что каждый из них профессионал с большой буквы. Теперь я знаю, что в дальнейшем и я и члены моей семьи забудут про другие клиники и больницы.

У меня так получилось, что я уже падала с ног. У меня были проблемы со щитовидной железой, сильно болели кости,...

У меня так получилось, что я уже падала с ног. У меня были проблемы со щитовидной железой, сильно болели кости, очень отекала. После прохождения курса лечения в клинике меня можно сказать поставили на ноги. Я уже порекомендовала всем своим друзьям и знакомым решать проблемы со здоровьем в этой клинике, особенно учитывая стоимость лекарств, какие выписывают сейчас в поликлиниках.

Болею я давно. Сильно болят суставы, беспокоит щитовидная железа. Суставы болят и при нагрузке и в состоянии...

Болею я давно. Сильно болят суставы, беспокоит щитовидная железа. Суставы болят и при нагрузке и в состоянии покоя. Медикаментозное лечение я периодически прохожу с 98 года. Лечилась в Москве в Артроцентре, проходила санаторное лечение в Пятигорске. Однако мое состояние только усугублялось, было видно, что нету толку от такого лечения. О клинике Куликовича я узнала случайно от попутчицы в поезде. Больше всего в ее рассказе мне понравилось, что здесь лечат организм в целом, а не конкретную косточку. Т.е. причину из-за чего все получается. Через три месяца я созрела на приезд в Днепропетровск. Здесь я оперативно прошла комплексную диагностику. Атмосфера в клинике вселила в меня оптимизм. Замечательно когда всю диагностику можно пройти в одном месте. Мне здесь настолько понравилось, хочется еще сюда приехать, жаль, что живу я далеко.

Я 35 лет проработала преподавателем медицинской академии, более 10 лет страдаю ревматоидным артритом....

Я 35 лет проработала преподавателем медицинской академии, более 10 лет страдаю ревматоидным артритом. Перепробовала различные лекарства и стероидные и противоспалительные. Сейчас я пришла к выводу, что более эффективным и щадящим является лечение в клинике доктора Куликовича. Это лечение позволяет не принимать лекарства с сильными побочными эффектами и, в тоже время, лечебный эффект продолжительный и позволяет предотвратить воспаление сустава.

Попал я в клинику с проблемами поджелудочной железы. Пройдя диагностику и курс лечения остался доволен и...

Попал я в клинику с проблемами поджелудочной железы. Пройдя диагностику и курс лечения остался доволен и отношением персонала и конечным результатом. После прохождения курса лечебных сеансов болезненные ощущения не наблюдаются, самочувствие хорошее. Единственные не приятные воспоминания связаны с иглотератией, для меня это было немного болезненно. Остальные процедуры проходили комфортно. Я считаю, что в этой клинике оптимальное соотношение цена-качество.

хочу выразить сердечную благодарность Юрию Николаевичу Куликовичу за создание такой клиники, за доброе...

хочу выразить сердечную благодарность Юрию Николаевичу Куликовичу за создание такой клиники, за доброе чуткое отношение персонала начиная с администраторов: Татьяны Анатольевны и Ирины Александровны, которые всегда терпеливо расскажут о времени исследований, всему первому этажу сотрудников за диагностические исследования и лечебному отделению второго этажа. Хочу пожелать всем сотрудникам здоровья, успехов, счастья.

Мы приехали из далека, и очень тронуты заботой и вниманием которыми нас окружили в Клинике. Большое спасибо,...

Мы приехали из далека, и очень тронуты заботой и вниманием которыми нас окружили в Клинике. Большое спасибо, Тане из регистратуры, которая помогла нам устроиться. Моя доченька с удовольствием ходила на занятия к логопеду Светлане Николаевне, очень грамотному и очень чуткому врачу. Которая своей требовательностью заставляла дочку серьёзно работать. Я Вам очень благодарна за все, Светлане Николаевне. Спасибо за чуткость, внимание и профессиональность неврологу Валерию Ивановичу. Мы очень довольны результатами лечения. Желаем счастья Оксанке (каб.№1). Большое спасибо за её внимание, любовь и заботу к моему ребенку. Побольше бы таких врачей и хороших людей как у Вас в Клинике.

Обратиться в клинику меня заставили жалобы на опорно двигательный аппарат, болели коленные, тазобедренные...

Обратиться в клинику меня заставили жалобы на опорно двигательный аппарат, болели коленные, тазобедренные суставы, косточки на ногах. После обследования выяснилось, что у меня проблемы со многими внутренними органами, о некоторых я даже не догадывалась. Так раньше меня беспокоила поясница, я думала, что это радикулит, а оказались почки. После лечения в клинике жалоб нет. Улучшилась подвижность в суставах, они перестали болеть. Нормализовались анализы, моча, кровь. Здесь мне очень понравилось, особенно внимательное и добросовестное отношение ко мне. Ранее после лечения в других местах мне было не ясно, помогло лечение или нет, в этой клинике чувствую результат лечения.

Хочу высказать благодарность всему коллективу Клиники Куликовича, за оказанную мне помощь в лечении, в...

Хочу высказать благодарность всему коллективу Клиники Куликовича, за оказанную мне помощь в лечении, в особенности очень внимательным мед.сестрам. Не знаю сколько бы ёще пришлось болеть, если бы не Ваша Клиника. Большое спасибо, за всё!

Первое, что впечатлило - это фешенебельность, но ведь это оболочка. Самое главное, что в процессе лечения я...

Первое, что впечатлило - это фешенебельность, но ведь это оболочка. Самое главное, что в процессе лечения я встретила теплоту, доброжелательность и внимание персонала. Особая благодарность лечащему врачу Юрию Владимировичу и всем его коллегам. Анализы покажут каковы результаты лечения, но общее состояние, эмоциональный подъем и всплеск энергии - это результат как лечебных процедур, так и приятного время препровождения и интересного общения.

Очень благодарна людям, которые здесь работают за доброту и тепло, что они излучают, за отношение, которое...

Очень благодарна людям, которые здесь работают за доброту и тепло, что они излучают, за отношение, которое так дорого в нашей жизни, и именно сейчас. Большое спасибо врачам и медицинским сестрам, всему персоналу. Здесь чувствуешь себя спокойно и приходит уверенность, что с тобой все будет хорошо!

Сердечно выражаю благодарность всему персоналу клиники за теплое профессиональное отношение к пациенту, за...

Сердечно выражаю благодарность всему персоналу клиники за теплое профессиональное отношение к пациенту, за полное и, что самое важное для пенсионера - бесплатное лечение, дающее положительный результат (по остеопорозу). Огромное Вам спасибо за консультации и важные рекомендации. Здоровья Вам всем, творческих успехов в медицинской нелегкой работе, всего самого прекрасного!

Я, медработник с 17ти летним стажем работы. Работаю в ЦРБ г.Верхнеднепровска. До сегодняшнего дня в частных...

Я, медработник с 17ти летним стажем работы. Работаю в ЦРБ г.Верхнеднепровска. До сегодняшнего дня в частных клиниках не была и очень жалею, после этого, как посетила вашу клинику. С таким внимательным и профессиональным отношением к своему делу я столкнулась впервые. А сама обстановка в Клинике дает отличное настроение и веру в то, что все болезни излечимы. Огромная благодарность Куликовичу Ю.Н. за то, что он создал такую Клинику с прекрасным коллективом.

По химическому строению нейтральные жиры (триглицериды, ТГ) – это сложные эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот.

Триглицериды по составу могут быть простыми и смешанными . Если все три кислотных радикала принадлежат одной и той же жирной кислоте, то такие ТГ называются простыми . Примером таких простых триглицеридов являются триолеин, трипальмитин и т.д. Если же жирнокислотные радикалы принадлежат разным жирным кислотам, то такие триглицериды называют смешанными . В средней позиции в таких ТГ чаще находится ненасыщенная ЖК, крайние позиции занимают пальмитиновая или стеариновая кислоты.

Поступают в организм с пищей (экзогенные ТГ) и синтеризуются в организме (эндогенные ТГ). Образование ТГ может происходить в печени и жировой ткани. В печени ТГ синтезируются главным образом из углеводов. Для их синтеза используется глицерин, который под действием фермента глицерокиназы фосфорилируется до глицеро-3-фосфата. В жировой ткани активность этого фермента низкая, поэтому глицеро-3-фосфат образуется в ходе гликолитического расщепления глюкозы. Поэтому накопление ТГ в жировой ткани возможно только при активном гликолизе в состоянии сытости. В печени, синтезированные ТГ, включаются в состав ЛПОНП, и поступают в кровь. В жировой ткани они накапливаются в цитоплазме в виде жировых капель. ТГ являются главной формой накопления жирных кислот и фактически основным источником энергии у людей.

Клинико-диагностическое значение определения триглицеридов

Клинико-лабораторные методы определения содержания ТГ обычно включают 3 основных этапа: экстракцию ТГ, химический или ферментативный гидролиз полученного экстракта, количественное (в том числе с использованием ферментов) установление (при помощи абсорбционной фотометрии, флюориметрии) образовавшегося в результате гидролиза глицерина и его дериватов (продуктов распада).

Гипертриглицеридемия – повышение концентрации триглицеридов выше 2,3 ммоль/л отражает возрастание уровня ХМ и ЛПОНП.

• Первичная гиперлипидемия: наиболее высокое содержание в крови ТГ находят при гиперлипопротеинемии I типа, IV типа и V типа. Менее значительное увеличение уровня ТГ обнаруживают при ГЛП IIб и III типов. Также увеличение наблюдается при недостатке ЛХАТ (лецитинхолестеринацилтрансферазы).
• Вторичная гипертриглицеридемия наблюдается у больных ожирением, хронической ИБС, различными гепатитами, циррозами, при закупорке желчных путей, алкоголизме, гипертонической болезнью, панкреатитом, нефротическим синдромом, сахарным диабетом, при приеме оральных контрацептивов и кортикостероидов, гипотиреозе, врожденных гиперлипидемиях, беременности.

Гипотриглицеридемия. Уровень триглицеридов в плазме снижается при гипо- и абеталипопротеинемии, терминальной стадия цирроза печени, гипертиреозе, голодании, нарушении всасывания в кишечнике (синдром мальабсорбции), гипертиреозе, парентеральном введении витамина С и гепарина.

Норма ТГ в сыворотке – 0,5 – 2,3 ммоль/л (или 50 – 200 мг/дл)

Коэффициенты пересчета: мг/л ´0,0113 = ммоль/л

ммоль/л ´ 88,55 = мг/дл

Инструкция

по применению набора реагентов для количественного определения содержания триглицеридов в сыворотке или плазме крови человека

«ТРИГЛИЦЕРИДЫ - UTS»

Набор «ТРИГЛИЦЕРИДЫ - UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.

Регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05458

Информация для заказа набора «ТРИГЛИЦЕРИДЫ - UTS»

	Комплектация	Количество определений
	реагент 100 мл + калибратор 1 мл
	реагент 400 мл + калибратор 4 мл

* v – объем фотометрической ячейки анализатора.

1. НАЗНАЧЕНИЕ

1.1. Набор реагентов «ТРИГЛИЦЕРИДЫ - UTS» предназначен для определения содержания триглицеридов в сыворотке и плазме крови человека ферментативным методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний и контроля проводимого лечения пациентов.

1.2. Триглицериды являются главной формой накопления жирных кислот в организме и основным источником энергии у людей. Подобно холестерину, триглицериды поступают из клеток в кровь, связанными с липопротеинами. Содержание триглицеридов в крови повышается при заболеваниях таких как: гиперлипопротеинемии типов I, IIb, III, IV и V; вирусном гепатите, алкоголизме, остром и хроническом панкреатите . Снижение уровня триглицеридов может быть выявлено при гипо - и a-ß-липопротеимии, гипертиреозе, недостаточности питания . На этом основано клиническое значение анализа.

1.3. Потенциальный риск применения набора – класс 2а. Основной риск косвенный и связан с возможностью получения неверного результата анализа, что может привести к неправильно поставленному диагнозу и назначению неэффективного лечения пациента. Для снижения указанного риска необходимо в каждой аналитической серии контролировать качество результатов анализов с применением контрольных сывороток в соответствии с ОСТ 91500.13..

2. ПРИНЦИП МЕТОДА

2.1. Триглицериды, присутствующие в анализируемых образцах, образуют окрашенный комплекс по следующей схеме реакций (метод Триндера) :

Липопротеинлипаза катализирует гидролиз триглицеридов с образованием свободных жирных кислот (СЖК) и эквимолярного количества глицерина (1). Глицерин посредством глицеринкиназы в присутствии АТФ преобразуется в глицерин-3-фосфат (Г3Ф) и аденозин-5-дифосфат (АДФ) (2). Затем Г3Ф преобразуется под действием глицеринфосфо-3-оксидазы (ГФО) в дигидроацетонфосфат (ДАФ) и эквимолярное количество перекиси водорода (Н2О2) (3). В последней реакции Н2О2 вступает в реакцию с 4-аминофеназоном (4-АФ) и р-хлорфенолом в присутствии пероксидазы, с образованием окрашенного продукта (4), интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации триглицеридов в образце и измеряется фотометрически при 505 нм .

Триглицериды + H2O Липопротеинлипаза СЖК + Глицерин (1)

https://pandia.ru/text/78/094/images/image002_0.gif" width="88" height="16 src=">

Г3Ф + О2 Глицеринфосфо-3-оксидаза ДАФ + Н2О2 (3)

https://pandia.ru/text/78/094/images/image004_0.gif" width="76" height="16">

2.2. Фотометрическое измерение основано на наличии пика поглощения с максимумом при длине волны 505 нм молекулами хинонимина. Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет при этой длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности реакционной смеси пропорционально интенсивности окраски хинонимина и, следовательно, прямо пропорционально концентрации триглицеридов в пробе.

3. СОСТАВ НАБОРА

3.1. Набор реагентов «ТРИГЛИЦЕРИДЫ - UTS» поставляется в виде двух растворов: Реагента и калибратора.

Компоненты и их состав:

Наименование		Концентрация
	р-хлорфенол Липопротеинлипаза Глицеринкиназа Глицерин-3-оксидаза 4-аминоантипирин Пероксидаза Неионные ПАВ	50 ммоль/л 0,5 ммоль/л 40 ммоль/л
Калибратор	Водный раствор триглицеридов	2,25 ммоль/л

4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

4.1. Набор обеспечивает линейную область определения концентрации триглицеридов в диапазоне от 0,02 до 9,04 ммоль/л, отклонение от линейности не превышает 2,5%.

4.2. Чувствительность определения – не более 0,02 ммоль/л.

Измерение против

дист. вода

Температура реакции
Единица измерения
Число знаков после запятой
Изменение оптической плотности	Увеличивается
Соотношение реагент/проба
Концентрация калибратора, ммоль/л
Время реакции, мин
Нижний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.
Границы линейности, ммоль/л
Максимум нормы, ммоль/л
Минимум нормы, ммоль/л

8.7.2. При первом использовании набора, а также при получении новой серии необходимо провести калибровку с использованием входящего в состав набора калибратора триглицеридов.

8.7.3. Концентрация триглицеридов в образце рассчитывается в ммоль/л на основании калибровочной прямой, рассчитанной автоматически и сохраненной в памяти биохимического анализатора .

8.7.4. Если полученная концентрация триглицеридов в образце выше 9,04 ммоль/л, то исследование следует повторить: разбавить анализируемый образец 0,9% раствором NaCl в соотношении 1:1 и полученный результат определения умножить на 2.

9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

9.1. Набор реагентов « ТРИГЛИЦЕРИДЫ –UTS» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2..+8 °С в течение всего срока годности . Допускается хранение наборов при температуре до +25 °С не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается.

9.2. Срок годности набора указан на упаковке.

9.3. Реагент после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение всего срока годности в плотно закрытом флаконе.

9.4. Калибратор после вскрытия флакона может храниться при температуре +2..+8 °С в защищенном от света месте в течение 1 месяца в плотно закрытом флаконе.

9.5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.

Список литературы

1. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

2. Bucodo G et al. Quantitative determinathion of serum triglycerides by use of enzymes. Clin Chem 1973;:476-402.

3. Fossati P et al. Clin. Chem 1982;: .

4. Kaplan A et al. Triglycerides. Clin Chem The C. V. Mosby Co. St. Louis. Toronto.

5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.

Производится по заказу /О Юнимед».

По вопросам, касающимся качества набора « ТРИГЛИЦЕРИДЫ –UTS» следует обращаться в /О ЮНИМЕД» Москва, ул. Касаткина, 3а; Тел. (4, 1-31,

E-mail: *****@***ru; http://www. *****

В отечественных лабораториях уровень ТГ чаще всего определяют с помощью химических методов по уровню глицерина, образующегося при гидролизе. Это может приводить к получению завышенных результатов, так как повышение уровня глицерина в крови вызывают: некачественное взятие крови (выброс адреналина во время стресса), физические упражнения, состояния, сопровождающиеся метаболическим стрессом.

Наиболее предпочтительными являются ферментные методы исследования содержания ТГ с учетом содержания в холостой пробе свободного глицерина.

Метод определения содержания триглицеридов в сыворотке крови с ацетилацетоном

Принцип метода
Триглицериды экстрагируются из сыворотки крови. Освобожденный в результате щелочного гидролиза глицерин окисляют до формальдегида с помощью метаперйодата натрия. Образовавшийся формальдегид образует с ацетилацетоном в слабом уксусном растворе 3,5-диацетил-1,4-дигидролютидин, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию триглицеридов.

Необходимые реактивы

1.
Гептан.

2. Изопропиловый спирт (изопропанол).

3. 0,08 н серная кислота (примерно 2,2 мл концентрированной H2SO4 на 1 л воды).

4. Едкое кали, 6,25 моль/л: 17,8 г KON растворяют в 50 мл, осторожно добавляя гранулы щелочи в воду, охлаждая и перемешивая.

5. Уксусная кислота, 50 г/л.

6. Йодная кислота: растворяют 0,6 г HIO4 ∙ 2H2O (перйодная кислота) в 100 мл 5%-ной уксусной кислоты.

7. Аммония ацетат, 2 моль/л: растворяют 154 г ацетата аммония в воде, объем доводят до 1 л.

8. Ацетилацетоновый реактив: 1,5 мл ацетилацетона (СН3СОСН2СОСН3) разводят раствором уксуснокислого аммония до суммарного объема 200 мл. Хранят в сосуде из темного стекла.

9. Калибровочный раствор триолеина, 2 ммоль/л. Содержит 170 мг триолеина в 100 мл изопропилового спирта. Можно использовать и другие калибровочные растворы, перечисленные в примечании.

Примечание
Если использовать для калибровки раствор триолеина в изопропиловом спирте, то после экстракции и расслоения объем верхней фазы в калибровочных пробах оказывается больше, чем в опытных, что приводит к заниженным результатам анализа.
Чтобы избежать этой ошибки, рекомендуют калибровочный раствор готовить по следующей прописи: 510 мг триолеина растворить в 100 мл изопропилового спирта, из полученного исходного калибровочного раствора с содержанием 6 ммоль/л готовить по мере необходимости рабочий калибровочный раствор с содержанием 1,2 ммоль/л, разводя 1 объем исходного калибровочного раствора 4 объемами воды.

Ход определения
К 0,5 мл сыворотки или плазмы добавляют 2 мл гептана, 3,5 мл изопропилового спирта и 1 мл 0,08 н серной кислоты, перемешивают и через 5 мин центрифугируют. Из верхнего (гептанового) слоя отбирают 0,4 мл, добавляют 2 мл изопропилового спирта и 1 каплю 6,25 н KOH. Перемешивают, закрывают пробкой и нагревают на водяной бане в течение 10 мин при температуре 70 °С. После охлаждения добавляют 0,2 мл перйодатного реактива и 1 мл ацетилацетонового реактива, после перемешивания снова закрывают пробкой и нагревают еще 10 мин при 70 °С. Развивается желто-зеленое окрашивание, интенсивность которого измеряют, фотометрируя при длине волны 425 нм в кюветах с длиной оптического пути 0,5 см против холостой пробы, которую ставят так же, как и опытную, но вместо исследуемого материала берут 0,5 мл воды.

Калибровочную пробу ставят так же, как и опытную, но вместо сыворотки или плазмы берут 0,5 мл калибровочного раствора и 0,5 мл воды; развивающаяся окраска соответствует окраске опытной пробы, в которую взята плазма с содержанием триглицеридов 2 ммоль/л.
Расчет проводят по правилу пропорций или по калибровочному графику. Если используется калибровочный раствор, уже содержащий воду, то при постановке калибровочного опыта берут 0,5 мл рабочего калибровочного раствора, а воду не добавляют.

Примечание
При отсутствии триолеина или трибутирина для калибровки можно использовать растительное масло, принимая, что образующие его триглицериды имеют ту же молекулярную массу, что и триолеин. Можно проводить калибровку, используя раствор глицерина в этаноле, в этом случае его непосредственно добавляют к щелочному раствору едкого калия.

Метод определения содержания триглицеридов в сыворотке крови с хромотроповой кислотой

Принцип метода
Триглицериды гидролизуются с освобождением глицерина, который окисляется перйодатом натрия до формальдегида. Образующиеся при этом йодаты и непрореагировавшие перйодаты восстанавливаются избытком бисульфита натрия, после чего формальдегид определяют по цветной реакции с хромотроповой кислотой.

Ферментативный метод определения содержания триглицеридов в сыворотке крови

Принцип метода

Триглицериды ферментативно гидролизуются до глицерола в соответствии со следующей схемой реакции:

Триглицериды ↔ глицерол + жирные кислоты;

Глицерол + АТФ ↔ глицерол-3-Ф + АДФ;

Глицерол-3-Ф + О2 ↔ фосфоглицероальдегид + Н2О2;

Н2О2 + 4-аминоантипирин + n-хлорфенол ↔ Н2О2 + хинонимин.

Образующаяся в ходе ферментативной реакции окраска пропорциональна содержанию ТГ.
Референтные пределы для ТГ, установленные Национальной программой по холестерину (США), широки. Рекомендованы пороговые уровни для оценки триглицеридемии - норма: 0,45-2,83 ммоль/л (44,9-282,7 мг/дл); пограничные величины: 2,82-5,65 ммоль/л; гипертриглицеридемия: выше 5,65 ммоль/л; высокий риск панкреатита: выше 11,3 ммоль/л.

Клинико-диагностическое значение
Увеличение концентрации ТГ (гипертриглицеридемия) наблюдается при эссенциальной гиперлипемии и при первичной (семейной) гиперлипопротеидемии. Считают, что определение ТГ является одним из решающих показателей для диагностики отдельных типов врожденного нарушения обмена липидов.

К вторичному повышению концентрации триглицеридов приводят ожирение, нарушение толерантности к глюкозе, эрозивные или плоскоклеточные ксантомы, вирусный гепатит, алкоголизм, алкогольный цирроз, билиарный цирроз, внепеченочная обтурация желчных путей, острый и хронический панкреатит, нефротический синдром, хроническая почечная недостаточность, гипертоническая болезнь, острый инфаркт миокарда, хроническая ИБС, тромбоз сосудов мозга, гипотиреоз, сахарный диабет, подагра, беременность, гликогенозы I, III, IV типов, большая талассемия, синдром Дауна, респираторный дистресс-синдром, невротическая анорексия, идиопатическая гиперкальциемия, острая перемежающаяся порфирия, стресс.

Снижение ТГ наблюдается при а-β-липопротеидемии, гиполипопротеидемии, хронических обструктивных заболеваниях легких, инфаркте мозга, гипертиреозе, гиперпаратиреозе, недостаточности питания, синдроме мальабсорбции, лимфангиоэктазии кишечника, поражении паренхимы печени.

Определение содержания холестерина и триглицеридов в плазме или сыворотке крови позволяет решить вопрос, о каком типе гиперлипидемий может идти речь.

Среди многочисленных методов определения холестерина в сыворотке крови наиболее распространен прямой метод, в основе которого лежит реакция Либермана - Бурхарда (метод Илька).

Клиническое значение

В норме холестерина крови 3,9-7,2 ммоль/л. Повышение показателя имеет место при семейной гиперхолестеринемии (ксантоматозе), гипотиреозе, декомпенсированном сахарном диабете, нефротическом синдроме, хроническом гепатите, билиарном циррозе, механической желтухе, гипопротеинемии, липидемии.

Показатели могут снижаться при остром гепатите и болезни Гоше; иногда при гипертиреозе, острых инфекциях, анемии, недоедании. Концентрация холестерина зависит от его метаболизма, на который влияют наследственность, питание, эндокринные железы и состояние внутренних органов.

Холестерин липопротеидов высокой плотности

Холестерин липопротеидов высокой плотности является интегральным показателем состояния обмена липопротеидов. Для определения холестерина ЛПВП (альфа-ХС) пользуются методом, в основу которого положен принцип: бетаи пребета-липопротеины осаждаются гепарином в присутствии солей марганца и удаляются центрифугированием, при этом хилосинкроны всплывают, образуя пленку. В растворе остаются только альфа- липопротеины, в которых содержание холестерина определяют любым унифицированным методом.

Калибровочную пробу ставят так же, как и в методе определения холестерина, но калибровочный раствор должен соответствовать содержанию холестерина 1-2 ммоль/л.

Нормальные величины альфа-ХС 0,9-1,9 ммоль/л. Содержание альфа-холестерина в крови здоровых людей мало меняется с возрастом и не подвержено колебаниям. Величины ниже 0,9 ммоль/л свидетельствуют о нарушении липидного обмена и угрозе развития атеросклероза.

Уровень общего холестерина выше 6,23 ммоль/л требует определения содержания триглицеридов.

Триглицериды

Унифицированным является метод определения триглицеридов по реакции с ацетилацетоном после экстракции смесью гептана и изопропилового спирта.

Клиническое значение

В норме триглицериды плазмы крови - 0,55-1,65 ммоль/л.

Снижение уровня триглицеридов развивается при плохом питании или врожденной альфа-беталипопротеинемии.

Исследование показателей липидного обмена нашло широкое применение в лабораторной клинической диагностике ввиду значимости выявления гиперлипидемии как фактора риска развития атеросклероза.

Таблица 26. Шкала показателей ХС, ТГ и альфа-ХС