Лейкоциты, их количество и основные группы. Методы определения количества лейкоцитов

Лейкоциты являются светлыми кровяными тельцами в виде клеток защитной системы, оберегающие человека от различных инфекций.

Если их число в крови увеличено, значит, есть вероятность инфекционного заболевания. Пониженное число лейкоцитов присуще людям со слабым иммунитетом.

Аналогично избыток клеток в мазке из влагалища, а также в моче говорит о воспалениях половых органов, болезнях почек и мочевого пузыря.

Что представляют собой лейкоциты

Это прозрачные кровяные клетки различных размеров (от 6 и до 20 микрон), круглого или аномального образца. Они имеют особый белок, помогающий перерабатывать микробы, разделять и соединять сторонние ферментные материи и следствия расщепления, зарождающиеся в человеческом теле в течение его функционирования.

Помимо этого, определенные типы лейкоцитов производят антитела (катализаторные частицы), нейтрализующие другие инородные бактерии, проникшие в ткани человеческого организма, на слизистые стенки и в кровь. Такое формирование и развитие клеток протекает в костном мозге.

Есть два определяющих вида лейкоцитов. Цитоплазма одной разновидности белых клеток содержит крупитчатость, поэтому они называются гранулоцитами (зернистыми лейкоцитами). Гранулоциты делятся на три формы:

эозинофилы;
базофилы;
нейтрофилы, которые делятся на сегментоядерные (взрослые) и палочкоядерные (молодые) клетки.

Виды клеток лейкоцитов

Существует целый вид клеток, относящийся к лейкоцитам. Любая клетка производит конкретное иммунное назначение. В медицине их принято называть:

базофилами;
моноцитами;
лимфоцитами;
эозинофилами;
нейтрофилами.

Теперь, подробнее о каждом типе клеток.

Базофилы считаются немногочисленной разновидностью белых клеток (0 — 1 %). Это, можно сказать, «спасение» при ранах и токсикозах от ядовитых животных и насекомых. Вследствие присутствия в базофилах огромного числа серотонина, гистамина и множества плектров аллергии, а также воспалений, они противодействуют попавшему яду в кожную материю и не дают ему разноситься по телу.
Моноциты аналогично называются фагоцитирующими мононуклеарами либо тканевыми макрофагами. По сравнению с эозинофилами и нейтрофилами выполняют фагоцитоз наибольших размеров частиц (отмерших белых клеток, поврежденных материй и бактерий), не гибнут вследствие фагоцитирования, а чистят и готовят область воспаления для следующего возобновления.
Лимфоциты владеют исключительной особенностью различать не только чужой фермент от своих клеток, но и обладают защитной реминисценцией (то есть «запоминают» все бациллы, с которыми они сталкивались и могут им противостоять). Если проникает какая-нибудь инфекция в тело человека, лимфоциты сразу принимают «незваных посетителей», определяют посторонние антигены и включают вереницу защитных действий. Вот поэтому красные тельца представляются главным элементом защиты всего организма.
Эозинофилы менее массовые, нежели нейтрофилы и имеют с ними сходные признаки – энергично передвигаются в сторону центра инфицирования, с легкостью идут сквозь сосуды и всасывают маленькие чужие белые клетки. Помимо этого, эозинофилы объединяют и уничтожают гистамин, а также остальных медиаторов болезни, выполняя антиаллергическую функцию, оберегают организм от глистных заражений и разных гельминтов.
Нейтрофилы являются наибольшими клетками лейкоцитов, которые составляют 93 — 96 % от всего числа и способны быстро двигаться к центру воспаления. Когда появляются грибковые либо бактериальные инфекции, они мгновенно увеличиваются и без труда пробиваются через оболочки сосудов в зараженные ткани. Основное назначение нейтрофилов – это поедание и разжижение небольших инородных частиц (фагоцитоз). Затем они отмирают.

Лейкоциты в моче

Сами лейкоциты можно определить путем исследования проверки мочи под микроскопом. Объем мочевого оседания у здоровых женщин содержит до 5 кровяных телец, у мужчин – до 3.

Беременные и дети имеют такое же число клеток в моче. Если проводится исследование мочи по Нечипоренко, тогда 1 мл может содержать до 4000 лейкоцитов. Такой норматив — стандартный.

Излишне много лейкоцитов в моче носит название лейкоцитурия. Чрезмерно увеличенное присутствие лейкоцитных клеток (когда в видимой области их число зашкаливает за 60), именуется пиурией. Это заболевание отличается содержанием гноя и говорит о том, что в органах мочеполовой системы есть гнойно-воспалительные развития.

Большей частью пиурию можно заметить невооруженным взглядом (наблюдается мутность мочи с присутствием «прожилок» и «хлопьев»).

По каким причинам могут повыситься лейкоциты в моче

Лейкоцитурия имеет возможность созревать, если:

содержаться камни в мочеточнике;
есть цистит;
пиелонефрит;
простатит;
гломерулонефрит;
уретрит;
была пересадка почки.

Пиурия, главным образом – это признак определенных патологических состояний:

инфекций мочеполовой системы;
аллергических воздействий;
болезней соединительных тканей;
присутствия очага воспалений;
глистных инвазий.

Главными факторами существования в моче множества кровяных телец у взрослого и ребенка есть воспалительные недомогания мочевыводящих путей, а также почек. Возможны резкие и постоянные пиелонефриты, сопровождающиеся болями в пояснице с обоих боков либо с одного, повышенная температура тела, изменение цвета мочи.

Довольно редко может возрасти объем кровяных клеток в моче при сильном и постоянном гломерулонефрите, при повреждении почек туберкулезным заболеванием, амилоидозе. Нередко случается и такое, когда обнаруживается немалое число белых телец, если не по правилам берут анализ. Это возможно, если у пациента с выявленным большим числом клеток в моче отсутствуют некоторые проявления недомогания.

Различные микроорганизмы, а также белые клетки, могут проникать в мочу из половых органов (часто у мужчин из мочеиспускательного пути, а у женщин из влагалища), где они находятся в огромном объеме. Это не значит, что кровяные тельца могут пребывать только у больных. Такое возможно и у здорового человека.

Лейкоциты в период беременности

В это время кровяные тельца в моче можно встретить довольно-таки часто. В момент протекания беременности увеличивается возможность попадания заражения в мочевую систему. Такое действие игнорировать никак нельзя. Лейкоцитурия без признаков на протяжении беременности должна лечиться антибиотиками.

Правильная подготовка к сдаче мочи

Достаточно часто повышенный уровень лейкоцитов в моче считается последствием неверного ее забора и следующего произведения исследования. Этим объясняется отсутствие проявлений каких-нибудь других заболеваний. У мужчин источником лейкоцитов в моче может быть мочеиспускательный канал, у женщин – влагалище.

Чтобы получить правдивое следствие анализа, требуется:

набирать мочу в очищенную емкость;
до забора мочи хорошо помыть половые органы моющим средством либо принять душ;
женщинам перед сдачей анализа необходимо прикрыть проход во влагалище ваткой, немного расширить пальцами половые губы, чтобы выбрасывающаяся моча из мочеиспускательного пути не задевала их;
первую струю мочи нужно спустить в унитаз;
для исследования берется лишь средний порцион мочи.

Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и ее разведении в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 крови.

Оборудование и реактивы:

смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

счетная камера;

микроскоп.

Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нанесены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).

Ход исследования: при взятии крови для подсчета лейкоцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения достоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле

X = (А х 4000 х В)/Б,

где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл.

Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 10 9 /л. Уменьшение их числа в крови называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).

Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.

Относительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.

Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнетения функциональной способности костного мозга в результате воздействия токсических веществ (мышьяк, бензол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микробов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).

Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».

При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10 9 /л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10 9 /л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

Метамиелоциты……0% отсутствуют

Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10 9 /л

Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10 9 /л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10 9 /л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10 9 /л

Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.

Основные причины нейтрофилеза.

Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

Воспаление или некроз ткани.

Миелопролиферативные заболевания.

Интоксикация.

Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).

Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В 12 -фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).

Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).

Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.

Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

Аллергические заболевания.

Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

Подострые и хронические бактериальные инфекции.

Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.

Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.

Основные причины лимфоцитоза.

Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).

Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В 12 -фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.

Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.

Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.

Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Оборудование и реактивы:

смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

счетная камера;

микроскоп.

X = (А х 4000 х В)/Б,

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10 9 /л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10 9 /л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

Метамиелоциты……0% отсутствуют

Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10 9 /л

Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10 9 /л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10 9 /л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10 9 /л

Основные причины нейтрофилеза.

Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

Воспаление или некроз ткани.

Миелопролиферативные заболевания.

Интоксикация.

Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

Аллергические заболевания.

Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

Подострые и хронические бактериальные инфекции.

Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

Основные причины лимфоцитоза.

Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Метод подсчета в камере. Взятие и разведение крови производят пробирочным методом. В пробирку (лучше видалевскую) вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение практически считается равным 1: 20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так же, как для подсчета эритроцитов.

Лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов (1-2 на большой квадрат), поэтому для точности подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных). Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм3, а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000 ґ 20 и делят на 1600 = а х 1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля.
В среднем ошибка метода составляет ± 7%.

Более точным (ошибка 2-3%) и совершенным является подсчет лейкоцитов с помощью электронных аппаратов. Подсчет лейкоцитов в счетчиках частиц производят по тому же принципу, что и эритроцитов. Предварительно кровь разводят и смешивают с каким-либо лизирующим эритроциты реактивом. В автоанализаторе “Техникон” в качестве такового применяют раствор уксусной кислоты, в аппаратах “Культер” и “Целлоскоп” - сапонин или сапоглобин, которые добавляют разведенными (1: 500, 1: 700) в изотоническом растворе хлорида натрия (6 капель на 20 мл разведения).

Подсчет лейкоцитарной формулы крови производят в окрашенных мазках периферической крови. Считать лучше ближе к концу мазка в самом тонком месте, не менее 200 клеток (исключение составляют выраженные лейкопении), а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Подсчет рекомендуется производить в одном порядке: половину клеток считать в верхней, половину - в нижней части мазка, не заходя на самый край и середину, по зигзагу (3-4 поля зрения вдоль мазка, 3-4 поля под прямым углом к середине мазка, затем 3-4 поля в сторону параллельно краю, вновь под прямым углом вверх и так далее в одну сторону).

Приготовление мазков.
Тщательно вымытым и обезжиренным предметным стеклом (его краем) прикасаются к капле крови на месте укола. Мазок делают шлифовальным стеклом, поставив его под углом в 45° к предметному стеклу впереди капли. Подведя стекло к этой капле, ждут, пока кровь расплывется вдоль его ребра, затем быстрым легким движением проводят шлифовальное стекло вперед, не отрывая от предметного раньше, чем иссякнет вся капля.

Правильно сделанный мазок имеет желтоватый цвет (тонкий), не достигает краев стекла и заканчивается в виде следа (усов).

Окрашивание сухих мазков производят после предварительной фиксации. Лучшая фиксация достигается в абсолютном метиленовом спирте (3-5 мин) или в смеси Никифорова из равных частей абсолютного этилового спирта и эфира (30 мин).

К основным гематологическим краскам относят метиленовый синий и его производное - азур I (метиленовый азуровый) и азур II (смесь равных частей азура I и метиленового синего), к кислым - водорастворимый желтый эозин.

● Окраска по Романовскому-Гимзе.
Краска Романовского-Гимзе (заводского приготовления) имеет следующий состав: азур II - 3 г, водорастворимый желтый эозин - 0,8 г, метиловый спирт - 250 мл и глицерин - 250 мл. Рабочий раствор краски приготавливают из расчета 1,5-2 капли готовой краски на 1 мл дистиллированной воды. Краску наливают на мазок возможно более высоким слоем; длительность окраски - 30-35 мин. По истечении этого срока мазки промывают водой и высушивают на воздухе. При этом способе удается хорошо дифференцировать ядро, но гораздо хуже - нейтрофильную зернистость цитоплазмы, поэтому его широко используют для окраски мазка периферической крови.

● Комбинированная окраска Мая-Грюнвальда-Романовского-Гимзе по Паппенгейму. На фиксированный мазок наливают пипеткой готовый краситель - фиксатор Мая-Грюнвальда, представляющий собой раствор эозинметиленового синего в метиленовом спирте, на 3 мин. Через 3 мин к покрывающей раствор краске добавляют равное количество дистиллированной воды и продолжают окрашивание еще 1 мин.
После этого краску смывают и мазок высушивают на воздухе. Затем высушенный мазок докрашивают свежеприготовленным водным раствором краски Романовского в течение 8-15 мин. Этот метод считается наилучшим, особенно для окраски мазков костно-мозговых пунктатов.

Увеличение числа лейкоцитов в периферической крови выше нормального уровня называют лейкоцитозом, уменьшение - лейкопенией. Лейкоцитоз (лейкопения) редко характеризуется пропорциональным увеличением (уменьшением) числа лейкоцитов всех видов, например лейкоцитоз при сгущении крови. В большинстве случаев имеется увеличение числа (уменьшение) какого-либо одного типа клеток. Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным в зависимости от общего содержания лейкоцитов - нормального, повышенного или пониженного. Изменение числа, соотношения отдельных форм и морфологии лейкоцитов зависит от вида и вирулентности возбудителя, характера, течения и распространенности патологического процесса, индивидуальной реакции организма.